背景：慢性腎臟病 (CKD) 是一個(gè)日益嚴重的公共衛生問(wèn)題，現有的治療方法不足以限制疾病進(jìn)展。新的策略，包括基于再生細胞的療法，已經(jīng)成為治療的替代品。包括我們自己在內的幾個(gè)小組的結果報告了間充質(zhì)基質(zhì)細胞 (MSC) 在CKD小鼠模型的功能恢復和組織損傷預防中的支持作用。在這些數據的推動(dòng)下，開(kāi)展了一項開(kāi)放性試點(diǎn)研究，以評估單次注射自體脂肪組織來(lái)源的 MSCs (AT-MSCs) 治療CKD的安全性和有效性。

介紹

慢性腎臟病 (CKD) 的特征是腎功能進(jìn)行性和永久性喪失。由于慢性腎臟病的發(fā)病率和患病率不斷增加、腎臟替代療法的高成本以及發(fā)病率和死亡率的顯著(zhù)增加，慢性腎臟病代表了一個(gè)主要的公共衛生問(wèn)題?？捎玫乃幬锊荒茏柚辜膊∵M(jìn)展并具有重大風(fēng)險，因此促使人們尋找新的治療策略。

間充質(zhì)基質(zhì)細胞 (MSC) 是多能基質(zhì)細胞，存在于血管化器官的血管網(wǎng)絡(luò )內，在全身具有廣泛的組織支持作用。在糖尿病腎病、部分腎切除術(shù)和同種異體移植物腎病的嚙齒動(dòng)物模型中，已經(jīng)證實(shí)了間充質(zhì)干細胞在實(shí)驗性急性腎損傷以及慢性腎病中保護腎臟結構和功能的能力。

間充質(zhì)干細胞的有益作用包括限制炎癥反應、減少蛋白尿以及保護腎小管和間質(zhì)結構。值得注意的是，全骨髓 (BM) 移植似乎沒(méi)有發(fā)揮類(lèi)似的有益效果。CKD與干細胞數量和功能的喪失有關(guān)，尤其是當患者進(jìn)展到疾病末期時(shí)。證據還表明，與CKD和尿毒癥毒素（例如同型半胱氨酸或對甲酚）相關(guān)的促炎狀態(tài)可以加速干細胞衰老和細胞凋亡。

最近的一項薈萃??分析表明，間充質(zhì)干細胞的療法在慢性腎病的臨床前模型中是有效的，并且全身施用間充質(zhì)干細胞被認為可以安全地治療人類(lèi)的腎臟和心血管疾病。然而，間充質(zhì)干細胞療法在治療慢性腎病的臨床轉化仍處于早期階段，最佳細胞來(lái)源、給藥方式和預期臨床效果仍未得到很好的表征。

因此，我們開(kāi)展了一項開(kāi)放性試點(diǎn)研究，以評估單次注射自體脂肪組織來(lái)源的MSCs (AT-MSCs) 治療慢性腎病的安全性和有效性。

方法

自體脂肪間充質(zhì)干細胞以100萬(wàn)個(gè)細胞/kg的劑量靜脈輸注到6名慢性腎病患者體內。在間充質(zhì)干細胞輸注前和輸注后一年，患者病情穩定并隨訪(fǎng)一年。

主要結果

慢性腎病功能參數的變化，包括間充質(zhì)干細胞輸注后12個(gè)月內的GFR和定量24小時(shí)尿蛋白排泄率。由于這項研究的試點(diǎn)性質(zhì)和沒(méi)有對照組的小樣本量，變量在治療前12個(gè)月（控制期）進(jìn)行測量，并與MSC給藥后12個(gè)月（干預期）的測量值進(jìn)行比較。

次要結果

提示與治療相關(guān)的不良事件或警告的臨床或生化變化如下所述。

結果

輸液安全和患者隨訪(fǎng)

所有輸注均具有良好的耐受性，并且沒(méi)有報告與治療相關(guān)的不良事件。為評估疾病進(jìn)展，患者在進(jìn)入研究前12個(gè)月通過(guò)優(yōu)化和穩定治療穩定病情，然后隨訪(fǎng)一年。表1總結了所有數據。

蛋白尿測量

在治療前的12個(gè)月內，6名患者中有4名表現出蛋白質(zhì)排泄增加（增加20%至205%）。相反，在輸注MSC 后的12個(gè)月內，除4號腎發(fā)育不良患者外，所有病例的蛋白尿均從基線(xiàn)中位數0.75g/天（范圍0.15–9.57）下降至0.54（范圍，0.01-2.66克/天）輸注后第12個(gè)月（P=0.046）（圖2和補充表 1）。一名患者在輸注后表現出10%的下降，一名患者表現出60%的下降。值得注意的是，盡管MSC治療后患者4的蛋白質(zhì)排泄絕對水平?jīng)]有下降，但在MSC輸注后12個(gè)月內觀(guān)察到的蛋白尿增加百分比僅為12%，而在輸注前12個(gè)月內為205%，建議改進(jìn)。

為了評估疾病進(jìn)展的變化，患者 (Pat) 在進(jìn)入方案之前通過(guò)優(yōu)化和穩定治療穩定了12個(gè)月，并在A(yíng)T-MSC給藥后隨訪(fǎng)了一年。除患者4外，所有病例的蛋白尿均有所減少，從基線(xiàn)時(shí)的中位數0.75克/天（范圍0.15-9.57）到一個(gè)月時(shí)的中位數0.54（范圍0.01-2.66克/天）輸注后12 ( P=0.046)。為了簡(jiǎn)化曲線(xiàn)，僅描繪了主要的三個(gè)時(shí)間點(diǎn)（治療前12個(gè)月、輸注時(shí)間、治療后12個(gè)月）。

肌酐和MDRD eGFR

總體而言，通過(guò)血漿肌酐水平和MDRD eGFR評估的腎功能在MSC輸注后12個(gè)月時(shí)有所下降，盡管這種下降沒(méi)有統計學(xué)意義 ( P=0.065)。除患者4外，所有病例的eGFR均略有下降，范圍為7.5%至49.0%。

注射AT-MSC前后12個(gè)月時(shí)，通過(guò)血漿肌酐和MDRD估計的腎小球濾過(guò)率 (eGFR) 估計的腎功能。除患者4外，所有個(gè)案均顯示MDRD eGFR 略有下降，范圍從7.5%到 49%。每個(gè)患者治療前和治療后的回歸分析的eGFR斜率沒(méi)有顯著(zhù)差異。為了簡(jiǎn)化曲線(xiàn)，僅描繪了主要的三個(gè)時(shí)間點(diǎn)（治療前12個(gè)月、輸注時(shí)間、治療后12個(gè)月）。

討論

雖然并非所有6名患者的反應都相同，但這些結果表明，自體AT-MSC輸注減少了6名患者的24小時(shí)蛋白尿，而沒(méi)有明顯的不良反應。

關(guān)于干細胞治療慢性腎病的可能機制的證據越來(lái)越多。MSCs能夠自我更新、增殖和遷移到受損區域，在那里它們可以分化成成熟的功能細胞。由于在ivMSC輸注后可能會(huì )出現低水平的持續組織植入，因此人們認為治療益處主要由營(yíng)養和/或免疫介導的作用來(lái)解釋。MSC的免疫活性由分泌分子和細胞間接觸介導，并且可能涉及樹(shù)突狀細胞、B細胞、自然殺傷細胞和多種 T 輔助細胞。顯著(zhù)的旁分泌和營(yíng)養作用是由血管生成和抗細胞凋亡因子（如血管內皮生長(cháng)因子、胰島素生長(cháng)因子和肝細胞生長(cháng)因子）的分泌介導的。MSC產(chǎn)生的廣泛的分泌和免疫調節因子庫有可能促進(jìn)腎臟再生，因為MSC條件培養基可以提供與直接細胞相當的腎臟保護作用。

結論

總之，我們報告了一項初步試驗研究，提供證據表明可以為慢性腎病患者的細胞治療生成自體脂肪間充質(zhì)干細胞，并且輸注治療不會(huì )在治療后的一年內引起不良事件。

自體脂肪間充質(zhì)干細胞顯示出改變慢性腎病進(jìn)展的潛力，因為治療減少了尿蛋白排泄，尿蛋白排泄是腎臟疾病進(jìn)展的眾所周知的替代標志物。這種有希望的初步結果證明設計和進(jìn)行未來(lái)的臨床試驗是合理的，這些試驗進(jìn)一步評估自體脂肪間充質(zhì)干細胞治療慢性腎病的臨床反應和分子機制，并評估反應患者的特征以告知未來(lái)最好的治療候選人。